圖1、硫化物合成阻斷劑對PGF2α和LY83583反應的影響。A)幾種CSE拮抗劑(BCA，500μM；AOAA，100μM；HA，100μM；D，L-PAG，1mM；L-PAG，1mM)對30μM PGF2α誘發的收縮的影響。B)幾種PAG阻滯劑對10μM LY83583誘導的收縮的影響。

圖2、L-半胱氨酸對IPAs基礎張力和PGF2α誘導的張力的影響。A，顯示5μM PGF2α誘導NPV期間1mM L-半胱氨酸引起張力增加的示例軌跡。B，在5μM PGF2α誘導的NPV期間，半胱氨酸(3μM-3mM)引起的張力增加的濃度依賴性示例。C，使用B所述方案記錄的張力平均增加值，顯示為對80mM K+PSS反應的百分比，代表該動脈環的最大收縮量(n=15)。D，1mM半胱氨酸預處理對30μM PGF2α誘導的收縮的影響示例。E，在無CSE抑制劑(最左側條)和有CSE抑制劑的情況下，1mM L-半胱氨酸對30μM PGF2α誘導的收縮的平均±SEM影響。

圖3、L-PAG阻斷大鼠肝臟的半胱氨酸依賴性硫化物合成。使用unisense硫化氫電極記錄浸入1毫升含1mM半胱氨酸的PSS中的大鼠肝臟(175毫克)產生硫化物并釋放到PSS中的情況。小瓶密封以防止硫化物流失，溶液預先用N2/CO2通氣以去除O2，從而最大限度地減少硫化物氧化。A，在沒有(左)和有(右)1mM L-PAG的情況下，1mM半胱氨酸釋放硫化物的示例。B，在沒有L-PAG和有L-PAG的情況下，半胱氨酸誘導硫化物釋放的平均值。實驗在成對組織中進行，結果與對照組織中觀察到的硫化物釋放量進行了歸一化處理。

圖4、在無PAG和有PAG的情況下，半胱氨酸對由0%O2氣體誘發的HPV的影響。在對照組條件下(B，1mM，n=21)和D、L-PAG(C，1mM，n=9)或L-PAG(D，1mM，n=8)存在下，以及不含L-半胱氨酸的時間對照組條件下(A，n=14)，IPA與L-半胱氨酸孵育30分鐘之前(開圓圈)和之后(填充圓圈)，HPV至0%O2。在每個面板中，左側為平均數據，右側為使用該方案進行實驗的張力曲線。

圖5、硫化物前體GSH、GSSG和同型半胱氨酸對PAG存在和不存在時0%O2氣體誘發的HPV的影響。在將IPAs與GSH(A，1mM，n=11)、GSSG(B，1mM，n=8)或同型半胱氨酸(C，1mM，n=5)孵育之前(空心圈)和之后(實心圈)，HPV降至0%O2。

結論與展望

本研究探討了硫化氫（H2S）是否通過其合成途徑參與缺氧性肺血管收縮（HPV）的調節。研究使用離體大鼠肺動脈（IPAs），通過檢測硫化氫前體（如半胱氨酸）和硫化氫合成抑制劑（如丙炔甘氨酸，PAG）對HPV的影響，來驗證這一假設。研究結果不支持H2S在HPV中作為氧感受器的角色。盡管半胱氨酸可以通過CSE途徑生成H2S來增強HPV和NPV，但在正常條件下，HPV并不依賴于H2S的合成。H2S和缺氧可能通過共同的機制（如增加活性氧水平）引起肺動脈收縮，而不是通過H2S的直接合成。通過RT-PCR檢測到大鼠肺動脈中表達CSE和MST的mRNA，但未檢測到CBS的表達，表明H2S的合成可能主要通過CSE途徑。Unisense微電極系統在本研究中發揮了至關重要的作用，通過直接測量硫化氫的濃度變化，為研究H2S在肺動脈生理和病理過程中的作用提供了關鍵數據。這些數據不僅驗證了實驗假設，還幫助研究者深入理解了H2S合成途徑在缺氧性肺血管收縮中的潛在角色。本研究為理解H2S在肺血管生理中的作用提供了新的見解，并對H2S是否參與HPV的調節提出了質疑。這一發現對研究缺氧性肺動脈高壓的機制和潛在治療靶點具有重要意義。